APLICAÇÕES BIOTECNOLÓGICAS DE POLISSACARÍDEOS SULFATADOS DE ALGAS MARINHAS EM PRODUTOS PESQUEIROS
Resumo
Polissacarídeos sulfatados (PSs) da rodofícea Botryocladia occidentalis compreendem macromoléculas complexas polianiônicas apresentando interesse biotecnológico. Analisou-se o uso de cloreto cetilpiridínio-CCP (M I) ou álcool (M II) como agentes precipitantes, comparando-se o rendimento e as características físico-químicas dos PSs extraídos de B. occidentalis coletada na praia cearense de Flecheiras. A alga desidratada (2g) foi digerida com papaína (24h; 60°C) em tampão de acetato de sódio 100 mM (pH 5,0), contendo cisteína e EDTA, ambos a 5 mM. No M I, os PSs precipitados com CCP 10% (24h;25°C) foram lavados com CCP 0,05%, centrifugados e dissolvidos em solução NaCl 2M:álcool (100:15;v:v). Após 24h de precipitação com álcool a 4°C, os PSs foram lavados duas vezes com álcool 80% e outra com álcool comercial. Já no M II, os PSs precipitados por 24h a 4°C com álcool comercial (2:1) foram centrifugados e lavados duas vezes com álcool comercial. Os valores de rendimento (%,n=3) dos PSs secos em estufa (55°C;6h) foram submetidos ao teste t-student, ao nível de 5%. A metacromasia foi avaliada usando o azul-dimetilmetileno como indicador. O padrão e densidade de cargas foram verificados por eletroforese em gel de agarose 0,5% usando como padrões condroitim sulfato, dermatam sulfato e heparina. O rendimento de PSs diferiu entre os métodos utilizados (11,81±0,68% e 15,73±3,80% para MI e MII, respectivamente, p < 0,05), porém foi equivalente a quantidade de amostra polissacarídica para apresentar metacromasia. Na eletroforese, PSs obtidos por ambos os métodos revelaram banda metacromática polidispersa com mobilidade a heparina após revelação com azul de toluidina, enquanto tratamento com “stains-all” caracterizou um perfil de PSs de intensidade na cor madeira, sugerindo a partir destas análises PSs de conformação estrutural semelhante. Assim, o MII mostra-se alternativo para obter PSs de B. occidentalis, reduzindo tempo e custo.Publicado
2019-01-01
Edição
Seção
IV Encontro de Iniciação Acadêmica
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