ASPECTOS BIOQUÍMICOS E AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE DE UM INIBIDOR DE TRIPSINA ISOLADO DE MORINDA CITRIFOLIA L. EM CÉLULAS CANCERÍGENAS HUMANAS

Autores

  • Adrianne Maia Lima
  • Adson Ávila de Souza
  • Felipe Pantoja Mesquita
  • Raquel Carvalho Montenegro
  • Hermógenes David de Oliveira
  • Hermogenes David de Oliveira

Resumo

Inibidores de peptidases (IPs) são moléculas ubíquas, capazes de regular a catálise de diversas peptidases envolvidas em processos fisiológicos e patológicos. Na literatura já têm sido reportados diversos IPs com potencial terapêutico contra doenças cardiovasculares, inflamatórias e câncer. Nosso grupo de pesquisa isolou a partir das folhas de Morinda citrifolia L. (noni) um inibidor de tripsina (NLTI, do inglês, Noni Leaf Trypsin Inhibitor;16 kDa), cujas características bioquímicas e efeitos terapêuticos são desconhecidos. Este trabalho objetivou caracterizar estrutural e funcionalmente NLTI, bem como avaliar seus efeitos sobre linhagens de células cancerígenas humanas in vitro. NLTI foi purificado a partir de folhas de noni através de tratamento térmico dos extratos proteicos obtidos e de cromatografia de afinidade (Tripsina-Sepharose-4B). Aspectos bioquímicos de NLTI, tais como suas propriedades cinéticas e estabilidade da atividade antitríptica, foram investigados. O potencial citotóxico foi avaliado através de ensaios in vitro sobre linhagens de células de adenocarcinoma gástrico (AGP01), carcinoma de língua (CAL 27), melanoma humano (SKMEL 103), carcinoma colorretal (HCT 116) e eritroleucêmica (K562). Adicionalmente, efeito citotóxico foi investigado em linhagem de fibroblastos humanos normais (MRC-5). NLTI possui inibição do tipo mista sobre tripsina bovina (CI50 de 16 x 10-9 M), com Ki de 1,69 x 10-9 M. A atividade antitríptica de NLTI não foi reduzida, mesmo quando o inibidor foi submetido a uma ampla faixa de pH (2,0-10,0; 30 min), temperatura (100 °C; 120 min) e à presença de agente redutor (DTT 100 mM; 120 min). NLTI (1 µM) foi capaz de reduzir (p<0,05) a viabilidade celular das linhagens K562 (42,43 ± 2,34%), HCT 116 (34,84 ± 0,31%), CAL 27 (12,35 ± 0,14%) e MRC-5 (16,20 ± 0,95%). Os resultados obtidos sugerem que NLTI possui potencial citotóxico e dão suporte para realização de ensaios in vivo, objetivando verificar o seu potencial terapêutico futuro.

Publicado

2019-01-01

Edição

Seção

XII Encontro de Pesquisa e Pós-Graduação