ESTABELECIMENTO DE UM PROTOCOLO PARA FORMAÇÃO DE BIOFILME MISTO DE ENTEROCOCCUS FAECALIS E CANDIDA ALBICANS.

Resumo

Infecções polimicrobianas são amplamente descritas na literatura e algumas dessas infecções apresentam interações entre bactérias e fungos. A bactéria Enterococcus faecalis e o fungo Candida albicans são comensais da microbiota humana e frequentemente são encontrados co-habitando os mesmos ambientes, como o trato gastro-intestinal. O objetivo do presente estudo foi determinar as condições experimentais para a formação in vitro de biofilme duoespécies formado por E. faecalis e C. albicans. Diferentes condições na formação do biofilme foram testadas, incluindo: meios de cultura (Brain Heart Infusion-BHI, RPMI) temperatura (37°C, 35 °C), período de incubação (24h, 48h, 72h), influência de lavagens após o período de adesão e da agitação. Para formação de biofilme, E. faecalis ATCC 29212 e C. albicans ATCC 10231 foram cultivadas em caldo BHI e caldo Yeast Nitrogen Base 5% dextrose, respectivamente, a 28 °C overnight. Suspensões microbianas na escala 0.5 McFarland foram misturadas na proporção 1:1 e depositadas em placas de 96 poços, as quais foram incubadas nas condições experimentais supracitadas. Para a análise dos biofilmes, foram realizados ensaios de quantificação de biomassa pelo método de cristal violeta e contagem de unidades formadoras de colônia (CFU) em ágar Mitis salivarius para E. faecalis e ágar Sabouraud com Clorafenicol para C. albicans. Os resultados foram avaliados por meio de ANOVA e Tukey’s multiple comparison post-test. Os biofilmes cultivados em BHI, a 37°C, por 48h apresentaram significantemente maior biomassa e colônias viáveis das duas espécies nos ensaios de CFU. Lavagens pós-adesão e agitação não beneficiaram significantemente nem a biomassa total, nem o CFU. Como perspectivas futuras, espera-se caracterizar a composição bioquímica e morfologia desses biofilmes. Agradecimento: Fundação Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico (FUNCAP).